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  高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

  应用范围：中药(复方)中相关成分的含量测定、中药(复方)指纹图谱、血浆、尿液等生物样品中相关成分的检测。

  实验流程：

  1、样品前处理：

  (a)中药样品：将中药样品使用溶剂溶解后，12000 r·min-1离心5 min。取上清液进样分析;

  (b)血浆(血清)、尿液：取一定体积的样品，进行蛋白沉淀(甲醇、乙腈等)、液-液萃取(乙酸乙酯、乙醚等)，涡旋振摇3 min，12000 r·min-1离心5 min。取上清液，氮气流吹干，复溶，12000 r·min-1离心5 min，取上清液进样分析。

  (c)粪便或其他组织样品：将粪便或其他组织样品匀浆后，参照(b)进行处理

  2、色谱条件优化：

  (a)更换流动相：改变有机相(甲醇/乙腈)-缓冲盐(不同比例的甲酸、磷酸)的比例，从而使得不同分析物在色谱柱上分离，同时保持良好的峰形。

  (b)更换波长：通过全波长扫描结合不同分析物的特性，选择最佳检测波长，使得分析物的检测灵敏度最佳。

  (c)更换色谱柱：针对不同种类的分析物，使用不同类型的色谱柱，使得分析物在色谱柱上有良好的保留，同时分离度良好(R≥1.5)。

  3、方法学确证：针对不同的检测项目(中药含量测定、生物样品中的药物检测等)，依据不同的相关法律、法规，对精密度、准确度、稳定性、线性等方法学项目进行确证，保证检测结果的准确性、可信性、重复性。

  4、检测及数据分析。

  服务说明及结果：

  1.客户提供：

  药品：中药提取液、中药冻干粉等

  血浆或血清：大于100 μL(需提供一定体积的空白血浆)

  尿液：大于500 μL(需提供一定体积的空白尿液)

  粪便或其他组织样品：10～100 mg

  2.公司提供：基本实验步骤、样品前处理、检测结果、数据处理过程及原始数据。

  3.实验周期：25～30个工作日。

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