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脓毒症动物模型构建方法总结
脓毒症:
是一种严重的全身性炎症反应综合征,是由感染引起的机体免疫系统过度激活和炎症反应失控的疾病。免疫系统反应过于激烈,导致炎症反应泛滥,从而引发全身性炎症反应综合征。
常见脓毒症造模方法:
1.细菌感染:通过注射细菌或其产生的细菌毒素来诱导脓毒症模型。常用的细菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。
2.LPS诱导:脂多糖(LPS)是细菌外膜中的主要成分,具有强烈的免疫激活作用。可以通过注射LPS来诱导炎症反应和脓毒症模型。常用的给药途径包括静脉注射、腹腔注射或气道暴露。
3.盲肠结扎穿刺(CLP):腹膜炎攻击方法的一种,主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成感染,从而构建脓毒症模型。
造模方法步骤
一、.盲肠结扎穿刺法(CLP):
1.实验开始前禁食不禁水12h,小鼠腹腔注射戊巴比妥钠,待小鼠完全麻醉后仰卧位固定。
2.对腹部喷酒精和碘伏消毒,去除腹部表面毛发,使用手术刀在腹壁切2cm切口,暴露盲肠,在回盲瓣远端结扎盲肠,然后用针刺穿刺盲肠2次,轻轻挤压盲肠,使少量的肠内容物渗出,将盲肠复位,缝合腹膜和皮肤。
3.小鼠正常饲养6h后皮下注射30ml/kg生理盐水和30mg/kg的头孢曲松。
二、LPS诱导法 :
1.大鼠用卵圆镊夹住其颈背部皮肤令其悬空,下腹部消毒。
2.缓慢腹腔注射内毒素(大肠杆菌脂多糖,LPS,8-10 mg/kg,即230-250g的大鼠,每只注射2-2.5mg,约存活5-7天)制成大鼠脓毒症模型。
3.造模后大鼠出现精神倦怠,躁动,呼吸、心率加快,腹胀,口鼻腔分泌物增多,竖毛,直肠温度变化超过1℃等表现则视为造模成功。
结果案例
镜下可见control组肠绒毛形态结构完整,未见出血
LPS组肠黏膜固有层下出血严重,可见炎细胞浸润
IL-9组肠黏膜固有层下出血严重,肌层可见炎细胞浸润